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mobivision atac默認(rèn)輸出結(jié)果文件如下,總計(jì)27個(gè)文件,其中SAMPLEID_out文件為軟件自動(dòng)生成,無需用戶指定:
1._flagdone為運(yùn)行成功的flag文件
2.logs為運(yùn)行日志文件夾
3.run_analysis_cmds.txt是完整命令行記錄
4.SAMPLEID_out是輸出結(jié)果文件根目錄
5.filtered_cell_fragments_matrix是過濾后的細(xì)胞-片段矩陣文件根目錄
6.filtered_cell_peaks_matrix是過濾后的細(xì)胞-peak矩陣文件根目錄
7.SAMPLEID.bam是比對(duì)結(jié)果文件
8.SAMPLEID.bw是比對(duì)結(jié)果可視化文件
9.SAMPLEID.filtered.bed.gz是去重并過濾后的片段文件
10.SAMPLEID_Report.html是html格式的質(zhì)控報(bào)告
11.AMPLEID_Report.json是json格式的質(zhì)控報(bào)告
12.summary.csv是csv格式的文庫信息
13.raw_cell_peaks_matrix是未過濾的細(xì)胞-peak矩陣文件根目錄
14.fragmentsInCells.tsv.gz為過濾細(xì)胞后所得的片段文件
15.fragmentsInCells.tsv.gz.tbi為過濾細(xì)胞后所得的片段文件的索引文件
16.fragmentsInPeaks.tsv.gz
17.fragmentsInPeaks.tsv.gz.tbi
18.SAMPLEID.narrowPeak/broadPeak為全文庫peak文件
19.peaks_annotation.tsv.gz為檢查到的peak的注釋信息
20.statistics.all.csv為質(zhì)控結(jié)果信息文件

mobivision atac分析完成后,會(huì)生成一html質(zhì)控報(bào)告,報(bào)告分為6個(gè)板塊;

樣本欄包含以下信息:
sample ID:樣本名稱
Reference:參考基因組名稱
Library:文庫名稱
Pipeline Version:分析軟件版本

Cells欄左圖為Barcode Rank Plot,右側(cè)為細(xì)胞相關(guān)指標(biāo),內(nèi)容與overview欄目一致。該報(bào)告通過統(tǒng)計(jì)每個(gè)細(xì)胞標(biāo)簽對(duì)應(yīng)的有效片段數(shù)目,并將細(xì)胞標(biāo)簽按照有效片段數(shù)目由高到低排序,獲得細(xì)胞標(biāo)簽序號(hào)。例如有效片段數(shù)目最多的細(xì)胞標(biāo)簽,序號(hào)為1,以此類推。以細(xì)胞標(biāo)簽序號(hào)作為x軸橫坐標(biāo),用對(duì)應(yīng)細(xì)胞標(biāo)簽的有效片段數(shù)目作為y軸縱坐標(biāo),作圖,得到Barcode Rank Plot。用戶也可通過點(diǎn)擊對(duì)應(yīng)欄目的右上角問號(hào),獲得更為詳細(xì)的help信息(其他欄目也相同),如下:


Mapping欄左圖為片段長(zhǎng)度分布圖,橫坐標(biāo)為文庫中片段的長(zhǎng)度,縱坐標(biāo)為片段的數(shù)目,整體展示了不同長(zhǎng)度的插入DNA片段分布。Mapping欄右側(cè)為文庫的比對(duì)信息。

Targeting欄左圖為Peaks Targeting Plot,圖中一個(gè)點(diǎn)代表一個(gè)細(xì)胞標(biāo)簽。x-軸代表每個(gè)細(xì)胞標(biāo)簽標(biāo)記到的片段數(shù),y-軸表示每個(gè)細(xì)胞標(biāo)簽中,與峰重合的片段的占比?!?xì)胞’與‘非細(xì)胞’分別用不同的顏色表示。Targeting欄右側(cè)為文庫中檢測(cè)到的峰的信息。

Sequencing欄左圖為文庫復(fù)雜性曲線圖 Library Complexity Plot,該圖展示了此文庫在不同測(cè)序深度下(通過隨機(jī)降低取樣獲得)平均每個(gè)細(xì)胞檢測(cè)到的片段數(shù)目。當(dāng)文庫中所有片段均被檢測(cè)到時(shí),單個(gè)細(xì)胞的片段數(shù)將不再隨著測(cè)序深度的增加而升高。右側(cè)為文庫信息結(jié)果。

t-SNE Projection欄左圖為有效片段數(shù)t-SNE圖,該圖展示了單個(gè)細(xì)胞中的有效片段數(shù)量。X、Y軸分別對(duì)應(yīng)由t-SNE算法產(chǎn)生的二維嵌入坐標(biāo)。一個(gè)點(diǎn)代表一個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞含有的有效片段越多,表明該細(xì)胞檢測(cè)到的ATAC信號(hào)越多。右圖為分群聚類t-SNE圖,該圖展示了通過細(xì)胞聚類算法計(jì)算得到的細(xì)胞分布情況。一個(gè)點(diǎn)代表一個(gè)細(xì)胞,點(diǎn)之間顏色越接近,表明其代表的細(xì)胞之間的ATAC信號(hào)圖譜越相似。