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MobiVision表觀組-chip結果釋義

輸出結果文件

mobivision chip默認輸出結果文件如下,總計25個文件,其中SAMPLEID_out文件為軟件自動生成,無需用戶指定:

1._flagdone為運行成功的flag文件

2.logs為運行日志文件夾

3.run_analysis_cmds.txt是完整命令行記錄

4.SAMPLEID_out是輸出結果文件根目錄

5.filtered_cell_fragments_matrix是過濾后的細胞-片段矩陣文件根目錄

6.filtered_cell_peaks_matrix是過濾后的細胞-peak矩陣文件根目錄

7.SAMPLEID.bam是比對結果文件

8.SAMPLEID.bw是比對結果可視化文件

9.SAMPLEID.filtered.bed.gz是去重并過濾后的片段文件

10.SAMPLEID_Report.html是html格式的質控報告

11.AMPLEID_Report.json是json格式的質控報告

12.summary.csv是csv格式的文庫信息

13.raw_cell_peaks_matrix是未過濾的細胞-peak矩陣文件根目錄

14.fragmentsInCells.tsv.gz為過濾細胞后所得的片段文件

15.fragmentsInCells.tsv.gz.tbi為過濾細胞后所得的片段文件的索引文件

16.SAMPLEID.narrowPeak/broadPeak為全文庫peak文件

17.peaks_annotation.tsv.gz為檢查到的peak的注釋信息

18.statistics.all.csv為質控結果信息文件

image.png

質控報告釋義

mobivision chip分析完成后,會生成一html質控報告,報告分為6個板塊;

01 Overview

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樣本欄包含以下信息:

sample ID:樣本名稱

Reference:參考基因組名稱

Library:文庫名稱+抗體名稱

Pipeline Version:分析軟件版本

02 Cells

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Cells欄左圖為Barcode Rank Plot,右側為細胞相關指標,內(nèi)容與overview欄目一致。該報告通過統(tǒng)計每個細胞標簽對應的有效片段數(shù)目,并將細胞標簽按照有效片段數(shù)目由高到低排序,獲得細胞標簽序號。例如有效片段數(shù)目最多的細胞標簽,序號為1,以此類推。以細胞標簽序號作為x軸橫坐標,用對應細胞標簽的有效片段數(shù)目作為y軸縱坐標,作圖,得到Barcode Rank Plot。用戶也可通過點擊對應欄目的右上角問號,獲得更為詳細的help信息(其他欄目也相同),如下:

image.png

03 Mapping

image.png

Mapping欄左圖為片段長度分布圖,橫坐標為文庫中片段的長度,縱坐標為片段的數(shù)目,整體展示了不同長度的插入DNA片段分布。Mapping欄右側為文庫的比對信息。

04 Targeting

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Targeting欄左圖為Peaks Targeting Plot,圖中一個點代表一個細胞標簽。x-軸代表每個細胞標簽標記到的片段數(shù),y-軸表示每個細胞標簽中,與峰重合的片段的占比?!毎c‘非細胞’分別用不同的顏色表示。Targeting欄右側為文庫中檢測到的峰的信息。

05 Sequencing

image.png

Sequencing欄左圖為文庫復雜性曲線圖 Library Complexity Plot,該圖展示了此文庫在不同測序深度下(通過隨機降低取樣獲得)平均每個細胞檢測到的片段數(shù)目。當文庫中所有片段均被檢測到時,單個細胞的片段數(shù)將不再隨著測序深度的增加而升高。右側為文庫信息結果。

06 t-SNE Projection

image.png

t-SNE Projection欄左圖為有效片段數(shù)t-SNE圖,該圖展示了單個細胞中的有效片段數(shù)量。X、Y軸分別對應由t-SNE算法產(chǎn)生的二維嵌入坐標。一個點代表一個細胞,細胞含有的有效片段越多,表明該細胞檢測到的ChIP信號越多。右圖為分群聚類t-SNE圖,該圖展示了通過細胞聚類算法計算得到的細胞分布情況。一個點代表一個細胞,點之間顏色越接近,表明其代表的細胞之間的ChIP信號圖譜越相似。

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